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熒光素標(biāo)記需要符合哪些要求？

常用熒光素標(biāo)記蛋白質(zhì)的方法有攪拌法和透析法兩種。以FITC（異硫氰酸熒光素）標(biāo)記為例，攪拌標(biāo)記法為：先將待標(biāo)記的蛋白質(zhì)溶液用0.5ml/LpH9.0的碳酸鹽緩沖液平衡，隨后在磁力攪拌下逐滴加入FITC溶液，在室溫持續(xù)攪拌4～6h后，離心，上清即為標(biāo)記物。此法適用于標(biāo)記體積較大，蛋白含量較高的抗體溶液。優(yōu)點(diǎn)是標(biāo)記時間短，熒光素用量少。但本法的影響因素多，若操作不當(dāng)會引起較強(qiáng)的非特異性熒光染色。透析法適用于標(biāo)記樣品量少，蛋白含量低的抗體溶液。此法標(biāo)記比較均勻，非特異染色也較低。方...

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【8月文獻(xiàn)戰(zhàn)報(bào)】Bioss抗體新增高分文獻(xiàn)精彩呈現(xiàn)

截至目前，引用Bioss產(chǎn)品發(fā)表的文獻(xiàn)共20043篇，總影響因子89696.086分，發(fā)表在Nature,Science,Cell以及Immunity等頂級期刊的文獻(xiàn)共53篇，合作單位覆蓋了清華、北大、復(fù)旦、華盛頓大學(xué)、麻省理工學(xué)院、東京大學(xué)以及紐約大學(xué)等國際研究機(jī)構(gòu)上百所。我們每月收集引用Bioss產(chǎn)品發(fā)表的文獻(xiàn)。若您在當(dāng)月已發(fā)表SCI文章，但未被我公司收集，請致電Bioss，我們將贈予現(xiàn)金鼓勵，金額標(biāo)準(zhǔn)請參考“發(fā)文章領(lǐng)獎金”活動頁面。近期收錄2022年8月引用Bioss產(chǎn)...

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細(xì)胞凋亡試劑盒在使用時需要注意些什么？

細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死不同，細(xì)胞凋亡是為維持環(huán)境穩(wěn)定，為更好的適應(yīng)勝春環(huán)境而主動爭取的一種死亡過程，它涉及一系列基因的激活、表達(dá)以及調(diào)控等作用，是一種字體損傷的現(xiàn)象。細(xì)胞凋亡是細(xì)胞的基本特征之一，在機(jī)體的胚胎發(fā)育、組織修復(fù)、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定等方面都起到十分重要的作用。AnnexinV是一種分子量為35.8KD的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白，能與細(xì)胞凋亡過程中翻轉(zhuǎn)到膜外的磷脂酰絲氨酸（Phosphatidylserine,PS）高親和力特異結(jié)合。FITC-AnnexinV結(jié)合到凋亡細(xì)胞后...

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熒光素標(biāo)記作為標(biāo)記需要符合哪些要求？

用于熒光素標(biāo)記的抗體，要求是高特異性和高親和力的。所用抗血清中不應(yīng)含有針對標(biāo)本中正常組織的抗體。一般需經(jīng)純化提取IgG后再作標(biāo)記。作為標(biāo)記的熒光素應(yīng)符合以下要求：①應(yīng)具有能與蛋白質(zhì)分子形成共價鍵的化學(xué)基團(tuán)，與蛋白質(zhì)結(jié)合后不易解離，而未結(jié)合的色素及其降解產(chǎn)物易于清除。②熒光效率高，與蛋白質(zhì)結(jié)合后，仍能保持較高的熒光效率。③熒光色澤與背景組織的色澤對比鮮明。④與蛋白質(zhì)結(jié)合后不影響蛋白質(zhì)原有的生化與免疫性質(zhì)。⑤標(biāo)記方法簡單、安全無毒。⑥與蛋白質(zhì)的結(jié)合物穩(wěn)定，易于保存。常用熒光素標(biāo)記...

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培養(yǎng)基的連續(xù)滅菌流程，一起來看看

1、定義：連續(xù)滅菌也叫連消，將配制好的并經(jīng)預(yù)熱（60～75℃）的培養(yǎng)基用泵連續(xù)輸入由直接蒸汽加熱的加熱塔，使在短時間內(nèi)達(dá)到滅菌溫度（126～132℃）。然后進(jìn)入維持罐（或維持管），使在滅菌溫度下維持3～7分鐘后再進(jìn)入冷卻管，使其冷卻至接種溫度并直接進(jìn)入已事先滅菌（空罐滅菌）過的發(fā)酵罐內(nèi)。其溫度一般以126～132℃為宜，總蒸汽壓力要求達(dá)到0.044～0.049MPa以上。培養(yǎng)基采用連續(xù)滅菌時，需在培養(yǎng)基進(jìn)入發(fā)酵罐前，直接用蒸汽進(jìn)行空罐滅菌（空消），用無菌空氣保壓，待培養(yǎng)基流入...

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【7月文獻(xiàn)戰(zhàn)報(bào)】Bioss抗體新增高分文獻(xiàn)精彩呈現(xiàn)

截止目前，引用Bioss產(chǎn)品發(fā)表的文獻(xiàn)共19603篇，總影響因子87327.086分，發(fā)表在Nature,Science,Cell以及Immunity等頂級期刊的文獻(xiàn)共53篇，合作單位覆蓋了清華、北大、復(fù)旦、華盛頓大學(xué)、麻省理工學(xué)院、東京大學(xué)以及紐約大學(xué)等國際研究機(jī)構(gòu)上百所。我們每月收集引用Bioss產(chǎn)品發(fā)表的文獻(xiàn)。若您在當(dāng)月已發(fā)表SCI文章，但未被我公司收集，請致電Bioss，我們將贈予現(xiàn)金鼓勵，金額標(biāo)準(zhǔn)請參考“發(fā)文章領(lǐng)獎金”活動頁面。近期收錄2022年7月引用Bioss產(chǎn)...

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重點(diǎn)推薦丨高靈敏度腫瘤標(biāo)志物MMP9配對抗體！

背景資料MMPs稱為基質(zhì)素，是鋅家族和依賴性肽鏈內(nèi)切酶，能夠降解細(xì)胞外基質(zhì)(Extracellularmatrix，ECM)的組成成分，包括層粘連蛋白、纖連蛋白、膠原以及其他組分?；|(zhì)金屬蛋白酶-9(Matrixmetalloproteinase-9，MMP9)，又為明膠酶B，由中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和多個轉(zhuǎn)化細(xì)胞分泌。MMP9以酶原的形式從胞內(nèi)分泌到胞外。在體外，MMP9通過有機(jī)汞制劑反應(yīng)才有活性，在體內(nèi)則可經(jīng)一系列蛋白酶級聯(lián)而激活。在結(jié)構(gòu)上，MMP9可分為5個不同的結(jié)構(gòu)域：...

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清楚這些內(nèi)容，使用cck8檢測試劑盒不再是難題！

cck8檢測試劑盒為MTT法的替代方法，是一種基于WST（水溶性四唑鹽，化學(xué)名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽）的廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒?？捎糜谒幬锖Y選、細(xì)胞增殖測定、細(xì)胞毒性測定、腫瘤藥敏等試驗(yàn)。使用說明：一、制作標(biāo)準(zhǔn)曲線（測定細(xì)胞具體數(shù)量時（測定細(xì)胞具體數(shù)量時）1、先用細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)所制備的細(xì)胞懸液中的細(xì)胞數(shù)量，然后接種細(xì)胞。2、按比例依次用培養(yǎng)基等比稀釋成一個細(xì)胞濃度梯度，一般...

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