1、定義:連續(xù)滅菌也叫連消,將配制好的并經(jīng)預(yù)熱(60~75℃)的培養(yǎng)基用泵連續(xù)輸入由直接蒸汽加熱的加熱塔,使在短時(shí)間內(nèi)達(dá)到滅菌溫度(126~132℃)。然后進(jìn)入維持罐(或維持管),使在滅菌溫度下維持3~7分鐘后再進(jìn)入冷卻管,使其冷卻至接種溫度并直接進(jìn)入已事先滅菌(空罐滅菌)過(guò)的發(fā)酵罐內(nèi)。其溫度一般以126~132 ℃為宜,總蒸汽壓力要求達(dá)到0.044~0.049 MPa以上。
培養(yǎng)基采用連續(xù)滅菌時(shí),需在培養(yǎng)基進(jìn)入發(fā)酵罐前,直接用蒸汽進(jìn)行空罐滅菌(空消),用無(wú)菌空氣保壓,待培養(yǎng)基流入罐后,開(kāi)始冷卻。滅菌時(shí)對(duì)培養(yǎng)基的加熱可采用各種加熱器。
培養(yǎng)基的冷卻方式有噴淋冷卻式、真空冷卻式、薄板換熱器式幾種方式,其過(guò)程均包括加熱、維持和冷卻階段。
2、連續(xù)滅菌的流程:
?。?)由熱交換器組成的滅菌系統(tǒng)
流程中采用了薄板換熱器作為培養(yǎng)液的加熱和冷卻器,蒸汽在薄板換熱器的加熱段使培養(yǎng)液的溫度升高,經(jīng)維持段保溫一定時(shí)間后,培養(yǎng)基在薄板換熱器的冷卻段進(jìn)行冷卻,從而使培養(yǎng)基的預(yù)熱、加熱滅菌及冷卻過(guò)程可在同一設(shè)備內(nèi)完成。該流程的加熱和冷卻時(shí)間比噴射加熱連續(xù)滅菌流程要長(zhǎng)些,但由于在培養(yǎng)基的預(yù)熱過(guò)程同時(shí)也起到了滅菌后培養(yǎng)基的冷卻,因而節(jié)約了蒸汽和冷卻水的用量。
?。?)蒸汽直接噴射型的連續(xù)滅菌系統(tǒng)
流程中采用了蒸汽噴射器,它使培養(yǎng)液與高溫蒸汽直接接觸,從而在短時(shí)間內(nèi)可將培養(yǎng)液急速升溫至預(yù)定的滅菌溫度然后在該溫度下維持一段時(shí)間滅菌,滅菌后的培養(yǎng)基通過(guò)一膨脹閥進(jìn)入真空冷卻器急速冷卻,從圖中可以看出,由于該流程中培養(yǎng)基受熱時(shí)間短,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的損失也就不很?chē)?yán)重,同時(shí)該流程保證了培養(yǎng)基物料先進(jìn)先出,避免了過(guò)熱或滅菌不*等現(xiàn)象。
?。?)由連消塔、維持罐和噴淋冷卻組成的滅菌系統(tǒng)
培養(yǎng)基連續(xù)滅菌的基本設(shè)備一般包括:
①配料預(yù)熱罐,將配制好的料液預(yù)熱到60-70℃,以避免連續(xù)滅菌時(shí)由于料液與蒸汽溫度過(guò)大而產(chǎn)生水汽撞擊聲;
?、谶B消塔,連消塔的作用主要是使高溫蒸汽與料液迅速接觸混和,并使料液的溫度很快升高到滅菌溫度(126-132)℃;
?、劬S持罐,連消塔加熱的時(shí)間很短,光靠這段時(shí)間的滅菌是不夠的,維持罐的作用是使料液在滅菌溫度下保持5-7min,以達(dá)到滅菌的目的;
④冷卻管,從維持罐出來(lái)的料液要經(jīng)過(guò)冷卻排管進(jìn)行冷卻,生產(chǎn)上一般采用冷水噴淋冷卻,冷卻到40-50℃后,輸送到預(yù)先已經(jīng)滅菌過(guò)的罐內(nèi)。